Prestations

L'accès à la plate-forme ImPACcell se fait selon 2 principaux modes :

1. La collaboration scientifique pour des projets utilisant des technologies de pointe nécessitant l'investissement des personnels d'ImPACcell et avec un objectif de publication
2. La prestation de service dans le cas d'analyses non valorisables par des publications ou communications scientifiques.

ImPACcell réalise des études biologiques, des tests de criblages, propose des alternatives à l'expérimentation animale

ImPACcell réalise des études biologiques à partir d’images de cellules en culture 2D (monocouche) et 3D (sphéroïdes) par microscopie à fluorescence robotisée. Cette technique basée sur l’imagerie est appelée HCS (High Content Screening).

La plateforme ImPACcell propose aussi des tests de criblages HTS par bioluminescence ou fluorescence. 
Un ensemble de tests cellulaires, associés à l’utilisation de 30 lignées cellulaires est disponible afin d’étudier les effets de molécules d’intérêt pharmacologique (chimiques, naturelles, siRNA) ou de facteurs environnementaux (polluants, ondes, vieillissement, etc) dans des domaines tels que l’environnement, la pharmacologie, la toxicologie, la cosmétologie et le contrôle qualité.

Pour répondre à une forte demande des utilisateurs, nous avons récemment mis en place une animalerie zebrafish. Nous disposons de plusieurs souches transgéniques et sauvages et nous proposons des tests de criblages sur les larves : Zebratox, Angiogenèse, Perturbateurs endocriniens... Cette nouveauté nous offre une opportunité de développement en proposant des tests sur organisme entier considéré comme alternative à l’expérimentation animale.

Pharmacologie, toxicologie, cosmétologie, contrôle qualité...

Ci dessous quelques tests que nous pouvons adapter pour le développement de vos projets de recherches. D'autres approches peuvent être développées en fonction de vos besoins.

1.    Test prolifération/toxicité

Recherche de l’inhibition de croissance et/ou de la cytotoxicité de molécules par comptage des noyaux colorés au Hoechst sur un panel de 8 lignées cellulaires sur 6 concentrations (détermination de l’IC50).

2.    Cycle cellulaire

• Détection de l'incorporation de BrdU.
Quantification des cellules en phase de synthèse d'ADN (phase S).
• Détection de l'Histone H3 Phosphorylée.
Ce test permet de calculer le pourcentage de cellules en mitose (phase M = index mitotique).

3.    Stress cellulaire et toxicité

• Test de mesure du dommage à l'ADN : induction gH2AX (génotoxicité).
• Test d'induction de l'apoptose : mesure de l'activité de la Caspase 3. 
• Test de mesure du stress cellulaire : induction de HSP70/HSP90. 
• Mesure de l’induction de ROS (Reactive oxygen species).
• Test de toxicité hépatique sur cellules HepaRG différenciées : quantification de l’induction de CYP3A4 et numération des canalicules biliaires.

4.    Signalisation intracellulaire

Activation de c-Jun et NFKB.
Ce test met en évidence l'effet de molécules ou de facteurs environnementaux sur l'activation ou l'inhibition de voies de signalisation intracellulaire impliqué dans l’inflammation.

cellules THP1 NFkb CJun - ImPACcell

Activation de p21/p53.
Ce test mesure l'activation ou l'inhibition des voies de signalisation intracellulaire impliquées dans l'arrêt du cycle cellulaire et/ou l'orientation vers la mort cellulaire programmée (apoptose).

5.    Immunostimulation

• Activation de COX-2.
Cet essai est principalement destiné aux cellules immunitaires, en particulier aux macrophages. Ce test met en évidence l'induction de l'enzyme COX-2 (synthèse de prostaglandine E2) par différentes immunostimulants.

• Activation d'iNOS.
Cet essai est basé sur le déclenchement de la réponse immunitaire. Suite à une stimulation, les cellules immunitaires déclenchent un mécanisme de défense en produisant des cytokines, des chimiokines et des radicaux oxydants ; l'expression et l'induction de iNOS dans les macrophages est un marqueur de cette réponse cellulaire.

6.    Analyse morphologique du cytosquelette, plasticité et motilité cellulaire

• Détection des fibres de F-Actine et de Tubuline.
Ce test permet de mesurer l'arrangement du réseau d'Actine et de Tubuline constituant le cytosquelette.

Cellules PC3 Tubulin et Actin - ImPACcell

• Détection de la Vinculine et quantification des points focaux d'adhésion.
Ce test permet la mise en évidence de la dynamique d'adhésion et de mobilité cellulaire.

• Imagerie de l’empreinte cellulaire sur billes fluorescentes.
Ce test permet la quantification de la motilité et de la motilité cellulaire par mesure de la surface de l'empreinte générée par les cellules en mouvement sur des billes fluorescentes.

Cell motility - ImPACcell

• Wound Healing.
Ce test permet la mise en évidence de la cicatrisation et de la mobilité cellulaire par mesure de la surface d'une déchirure réalisée mécaniquement sur un tapis cellulaire (vidéo microscopie en time lapse).
Wound Healing - ImPACcell

7.    Angiogénèse

Évaluation de l’effet de molécules sur la formation de « tube » représentant des néo vaisseaux par des cellules Huvec.

8.    Zebratox

Recherche de toxicité de molécules sur larves de poissons zèbres. Mesure par imagerie HCS (ArrayScan) des paramètres morphologiques des larves après 24, 48 et 72h de traitement.

9.    Dynamique de la polymérisation de la tubuline

Mesure in vitro de la cinétique par fluorimétrie de l’état polymérisé/dépolymérisé de la tubuline.

10.    Dosage ELISA de la production de testostérone

Évaluation de l’effet perturbateur de molécules sur la synthèse d’androgène sur cellules NCI H295R.

Signalisation intracellulaire, analyse morphologique du cytosquelette, plasticité et motilité cellulaire